视网膜母细胞瘤组织中PTEN蛋白表达的意义

时间：2016-02-29 15:13

　　视网膜母细胞瘤组织中PTEN蛋白表达的意义

　　作者：连黎红，杨万广

　　【关键词】 视网膜母细胞瘤

　　【摘要】 目的: 探讨PTEN蛋白在视网膜母细胞瘤(RB)组织中的表达及临床意义. 方法:采用免疫组化SP法观察36例RB和10例正常视网膜组织石蜡标本中PTEN的表达情况. 结果:21例(58.3%) RB组织中PTEN蛋白表达阳性，与正常视网膜组织相比(0%)存在显著性差异(P=0.0000). PTEN蛋白在分化和未分化RB组织中的表达率分别是73.7%和41.2%(P<0.05);在Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ期RB组织中的表达率分别是 75.0%，62.5%和41.7%(P<0.05). 随肿瘤细胞病理分型、临床分期的增高, PTEN蛋白阳性表达率明显降低. 结论:PTEN蛋白异常表达在RB的进展中有重要作用,检测PTEN的表达有助于判断病情与预后.

　　【关键词】 视网膜母细胞瘤; PTEN蛋白; 免疫组化

　　0引言

　　视网膜母细胞瘤(retinoblastoma, RB)是婴幼儿最常见的眼内恶性肿瘤. 由于临床RB的发现大多处于中晚期,治疗多为手术摘除眼球及眼外粒子束放射治疗. PTEN是抑癌基因,在多种进展期肿瘤中均有突变,其突变或杂合性缺失与恶性胶质瘤、前列腺癌等多种肿瘤的发生发展有密切关系. 但其与RB的关系尚未见报道. 我们通过对RB组织中PTEN蛋白水平的检测,探讨PTEN与RB发生发展之间的关系.

　　1材料和方法

　　1.1材料

　　RB组织36例和正常视网膜组织10例198001/200408存档蜡块,男24例,女12例,年龄1～11(平均3.6)岁. 临床分期：眼内期(Ⅰ期)9例,青光眼期(Ⅱ期)15例,眼外期(Ⅲ期)12例; 肿瘤病理学分型：分化型19例,未分化型17例.

　　1.2方法

　　判定免疫组化染色采用SP法. PTEN蛋白抗体及免疫组化试剂盒均购自北京中山生物技术有限公司. 用已知阳性片作为阳性对照,PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照. 显微镜下观察实验结果. 结果判定标准: PTEN阳性染色为肿瘤细胞膜及细胞质内见棕褐色颗粒,根据癌细胞染色程度和范围判断. 阴性(-):整个切片未见阳性染色;轻度阳性(+):阳性细胞<26%;中度阳性():阳性细胞26%～50%;强阳性():阳性细胞>50%.

　　统计学处理：采用SPSS 10.0统计软件对数据进行χ2检验及Spearman等级相关分析,检验水准α=0.05.

　　2结果

　　PTEN蛋白染色阳性反应信号呈棕黄色细小颗粒,位于细胞质内. 正常视网膜组织PTEN蛋白表达阳性率100%,RB组织PTEN蛋白表达阳性率58.3%(21/36). 结果表明, PTEN蛋白在RB组织中的表达较正常组织低,两者差异有统计学意义(P<0.05). RB组织PTEN蛋白的表达与临床分期和肿瘤病理分型等相关(Tab 1).表1RB组织PTEN蛋白表达与临床病理的关系(略)

　　3讨论

　　PTEN是Li等[1]于1997年发现的一种新的抑癌基因,该基因在多种人类肿瘤中存在突变、缺失,被认为是继p53基因之后发现的又一重要的抑癌基因. PTEN基因定位于10q23.3,由9个外显子和8个内含子组成. 迄今已发现PTEN在多种肿瘤如恶性胶质瘤、前列腺癌、乳腺癌中频繁发生突变[2,3]并可诱导SHG44人脑胶质瘤细胞凋亡[4],其基因突变导致 PTEN蛋白磷酸酶活性降低,使PIP2向PIP3的转化发生逆转,阻断了丝苏氨酸激酶(Akt)及其下游激酶的活性,使细胞恶性增殖增强,细胞凋亡活动失去控制;对肿瘤细胞的负调控作用受到抑制而使细胞发生迁移,以局部黏附的形式调节肿瘤细胞的浸润和转移[5]. 我们应用免疫组化技术检测了正常视网膜组织和RB组织中PTEN蛋白的表达,结果显示PTEN蛋白阳性信号主要位于细胞质,极少数细胞呈核阳性. 10例正常视网膜组织均呈PTEN蛋白阳性;RB组织PTEN蛋白表达阳性率58.3%. 提示PTEN蛋白失表达促进了RB的发生、发展,检测PTEN蛋白的表达可作为RB发生的监测指标. RB组织中PTEN表达与临床分期有关,眼外期PTEN表达明显低于青光眼期和眼内期,可能在RB的发生过程中, PTEN基因失活起着重要作用. PTEN蛋白表达与肿瘤的分化有一定关系，国内有学者在PTEN表达与子宫内膜癌临床病理特征的分析中发现, PTEN在不同病理分级的子宫内膜癌中的表达率存在显著性差异[6]. 我们的研究也表明, PTEN蛋白的表达与RB的组织分化程度呈正相关:组织分化程度高、恶性程度低者,PTEN蛋白表达的阳性率高;而PTEN蛋白失表达则多见于组织分化程度低、恶性程度高者. 这可能是因为PTEN基因的失活导致其磷酸酶活性丧失,使其下游分子Shc过度磷酸化,间接激活了丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路. 目前RB组织PTEN蛋白失表达的原因尚未明确. 我们认为,PTEN蛋白的低表达或失表达在RB的发生、发展中可能发挥重要作用,并有可能成为RB治疗的新靶点,为早期协助诊断、判断预后及指导治疗提供依据. 但由于RB的发生、发展是个复杂的过程,关于PTEN蛋白对RB发生、发展的影响的确切机制还有待于进一步研究.

(转载请注明出处 清华重离子/质子肿瘤治疗网)

　　(责任编辑：再生之旅)

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